GMP洁净区浮游菌测试方法及浮游菌测试记录表格

GMP洁净区浮游菌测试方法及浮游菌测试记录表格

1目的：GMP洁净区浮游菌测试方法及浮游菌测试记录表格规范洁净区浮游菌测试，使洁净室浮游菌的测定符合GMP要求。

2范围：适用于洁净区浮游菌的测定。建立GMP洁净区浮游菌测试方法及浮游菌测试记录表格

3职责：GMP洁净区浮游菌测试方法及浮游菌测试记录表格

3.1 QC：负责执行。

3.2 QC主任：负责检查。

3.3质量部经理：负责监督。

4依据：GMP洁净区浮游菌测试方法及浮游菌测试记录表格依据《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》（GB/T 16293-2010）。

5内容：

5.1定义 收集悬浮在空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到

可见的菌落数。

5.2测试状态及要求

5.2.1测试状态：静态测试和动态测试。测试状态必须符合生产的要求，并在记录中 注明测试状态5.2.2测试洁净区的温湿度达到规定的要求；静压差、换气次数必须控制在规定之内； 被测试洁净区已经过消毒。

5.3测试人员

5.3.1测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。

5.3.2静态测试时，室内测试人员不得多于二人。

5.4测试时间

5.4.1对单向流，如A级净化工作台，测试应在净化工作台风机正常运行不少于10min后开始。5.4.2对非单向流，如C级、D级净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。

5.5测试仪器

5.5.1Φ90mm玻璃培养皿；

5.5.2大豆酪蛋白琼脂培养基；

5.5.3压力灭菌器；

5.5.4恒温干燥箱；

5.5.5隔水式恒温水浴培养箱

5.5.6浮游菌采样器。

5.6测试前的准备

5.6.1培养皿：取洁净的培养皿，捆扎好后于121℃湿热灭菌20分钟或180℃干热灭菌2小时。

5.6.2培养基：根据测试需要称取一定量的干燥培养基，溶于一定量纯化水中，加热溶解，121℃湿热灭菌30分钟；

5.6.3注皿：取已灭菌的培养皿和培养基（冷却至约45℃）在无菌操作要求下，将培 养基注入培养皿，每皿约15ml。

5.6.4待培养基凝固后，将上述培养基倒置于隔水式恒温水浴培养箱中于30℃～35℃ 培养48h，均不得长菌（制备好的培养基平皿宜在2℃-8℃的环境中存放）。

5.6.5测试用Φ90mm玻璃培养皿应使用不锈钢桶盛装，使用75%乙醇擦拭表面消毒， 放置物流缓冲间（生产车间）或传递窗（质量部洁净区）紫外消毒30分钟后进入洁净区。

5.7测试地点

5.7.1可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点；

5.7.2距周围墙壁30cm以上的地板为宜；

5.7.3工作区测点位置离地0.8m～1.5m左右（略高于工作面）。

5.8采样点下限值

采样点数目

面积（m2）	洁净度级别
	A级	C级	D级
＜10	2～3	2	2
≥10～＜20	4	2	2
≥20～＜40	8	2	2
≥40～＜100	16	2	2
≥100～＜200	40	3	3
≥200～＜400	80	6	6
≥400～＜1000	160	13	13
≥1000～＜2000	400	32	32
≥2000	800	63	63
注：表中的面积，对于A级单向流工作台，是指送风口面积。对于C级非单向流洁净室 是指房间的面积。

5.9 采样量下限值

洁净度级别	采样量L/次
A级	1000
C级	100
D级	100

5.10采样次数 每个采样点一般采样一次。

5.11测试培养

取上述无菌培养基按《浮游空气尘菌采样器使用维护保养操作规程》操作完成后，立 即加盖，倒置于隔水式恒温水浴培养箱30～35℃培养48h后计数，并如实填写测试记录。 测试记录中应记录房间温度、相对湿度、压差及测试状态。

5.12平均菌落数的计算及结果评定

5.12.1平均菌落数的计算，

平均菌落数M=（M1+M2+…+MN）/n

式中：M–––平均菌落数；

M1––––1号培养皿菌落数

M2––––2号培养皿菌落数；

Mn––––n号培养皿菌落数

n––––培养皿总数。

5.12.2结果评定 用平均菌落数判断洁净区空气中的微生物。

5.12.2.1洁净区内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。

5.12.2.2若某洁净区内的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒，然 后重新采样两次，测试结果均须合格。

GMP洁净区浮游菌测试方法及浮游菌测试记录表格

测试依据

GB/T 16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》

测试状态

□静态□动态

其他测试合格情况

温湿度:压差:换气次数:

培养基制备及测试方法描述

规定：检验室的浮游菌测试。 每次：称取g培养基溶于ml水中，℃湿热灭菌min，待冷却至℃时，在无菌操作要求下将培养基分装φmm培养皿中，约ml/皿。用75%酒精消毒仪器盘，放入培养皿，盖上。根据洁净室洁净度级别设定采样量，校正流量，启动采样。采样结束仪器自动停止，取出培养皿。收集培养，同时做阴性对照。

采样器名称

浮游菌采样器

采样器型号

FKC-1

测试点分布编号

阳性对照室二更

S1

S2

阴性对照室二更

S9

S10

微生物限度室

S17

S18

阴性对照

阳性手消间

S3

S4

阴性手消间

S11

S12

微生物限度室工作台

S19

S20

阳性对照室

S5

S6

无菌室

S13

S14

1#

2#

3#

4#

生物安全柜

S7

S8

无菌室工作台

S15

S16

洁净度级别

300,000级

100,000级

10,000级

100级

判定标准

-----

≤500

≤100

≤5

培养温度 ℃ 培养时间 月日时至月日时 房间名称 阳性对照室二更 阳性手消间 阳性对照室 生物安全柜 阴性对照室二更 阴性手消间 测试点 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 采样量(L) 500 500 500 500 500 500 1000 1000 500 500 500 500 培养后菌落数(个) 平均浓度(个/m3) 结果判定 房间名称 无菌室 无菌室工作台 微生物限度室 微生物限度室工作台 阴性对照 测试点 S13 S14 S15 S16 S17 S18 S19 S20 1# 2# 3# 4# 采样量(L) 500 500 1000 1000 500 500 1000 1000 ------ ------ ------- ------ 培养后菌落数(个) 平均浓度(个/m3) 结果判定

结论

经测试，洁净区浮游菌测试结果：

检验

日期

复核

日期